噬菌體計數
噬菌體的效價是指1ml培養(yǎng)液中含侵染性的噬菌體粒子數。一般一個噬菌體形成一個噬菌斑,故可根據一定體積的噬菌體培養(yǎng)液所出現的噬菌斑形成單位(plaque-forming unit ,PFU),計算出噬菌體的效價。
噬菌斑(Plaque):將少量噬菌體與大量宿主細胞混合后,將此混合液與45℃左右的瓊脂培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中充分混勻,鋪平后培養(yǎng)。當一個噬菌體侵染一個敏感細胞后,不久即釋放出一群子代噬菌體,它們通過瓊脂層的擴散又侵染周圍的宿主細胞,并又引起它們裂解,如此經過多次重復經數小時至10余小時后,在平板表面布滿宿主細胞的菌苔上,肉眼就可看到的一個個透亮不長菌的小圓斑,這就是噬菌斑。
由此可見,噬菌斑的形成與細菌菌落的形成有點相似,所不同的只是噬菌斑甚像一個“負菌落”。迅數全自動菌落分析儀可應用于噬菌斑平板計數的自動化。 |