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細胞計數及活力測定

    培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好，所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
　　在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力，由組織中分離細胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。
　　用臺盼蘭染細胞，死細胞著色，活細胞不著色，從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應，也可測定細胞相對數和相對活力。
　　操作步驟：
　　(1)  細胞計數 
　　1、 將血球計數板及蓋片用擦試干凈，并將蓋片蓋在計數板上。
　　2、 將細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間。
　　3、 靜置3分鐘。
　　4、 鏡下觀察，計算計數板四大格細胞總數，壓線細胞只計左側和上方的。然后按下式計算：
　　細胞數/ml＝4大格細胞總數/ 4×10000 
　　注意：鏡下偶見由兩個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算，若細胞團占10％以上，說明分散不好，需重新制備細胞懸液。
　　(2)  細胞活力
　　1、 將細胞懸液以0.5ml加入試管中。
　　2、 加入0.5ml 0.4％臺盼蘭染液，染色2一3分鐘。
　　3、 吸取少許懸液涂于載玻片上，加上蓋片。
　　4、 鏡下取幾個任意視野分別計死細胞和活細胞數，計細胞活力。
　　死細胞能被臺盼蘭染上色，鏡下可見深蘭色的細胞，活細胞不被染色，鏡下呈無色透明狀。 活力測定可以和細胞計數合起來進行，但要考慮到染液對原細胞懸液的加倍稀釋作用。